تکنیک REAL TIME PCR چیست؟

تكنيك Real Time PCR به عنوان يكي از فراگيرترين روش هاي مورد استفاده در آزمايشگاه هاي مولكولي، سهم به سزايي در حصول داده ها و اطلاعات نوين از فرآيندهاي سلولي داشته است. اين تكنيك به دليل سادگي، سرعت و حساسيت بالا و هزينه نسبتاً كم در مقايسه با تكنيك هاي نوين ديگر، محبوبيت بسياري نزد پژوهشگران يافته است. با وجود سادگي ظاهري مباني نظري، حصول داده هاي معتبر و قابل استناد از اين تكنيك، نيازمند داشتن دركي عميق از پيچيدگي هاي ذاتي اين تكنيك است كه ناديده گرفتن آن در نهايت به توليد داده هاي اشتباه و البته گمراه كننده منجر خواهد شد.

---

---

منظور از Real-Time PCR يا PCR لحظه به لحظه، واكنش زنجيره اي پلي مرازي است كه سيگنال فلورسنت حاصله طي سيكل هاي آن به دنبال تكثير اسيدنوكلئيك، به طور مداوم جمع آوري مي گردد.
در واقع، “Real-Time PCR كمّي” تبديل سيگنال هاي فلورسنت حاصل از هر واكنش به يك مقدار عددي براي هر نمونه مي باشد.

از تكنيك Real-Time PCR در موارد زير مي توان بهره برد:

– بررسي بيان ژن ها

– بررسي تغييرات ايجاد شده در ميزان رونوشت هاي سلولي كه مي تواند نشان دهنده تغيير در پروتئين هاي مربوطه باشد

– بررسي وجود يا عدم وجود پاتوژن هاي باكتريايي يا ويروسي و به دنبال آن به كارگيري روش درماني مناسب

– ژن درماني

– ژنوتايپينگ

– تشخيص پلي مورفيسم ناشي از جهش تك نوكلئوتيد

– تشخيص متيلاسيون

– آناليز DNA ميتوكندريايي

– ميكروب شناسي و ويروس شناسي باليني

– پيوند مغز استخوان و ساير اعضا

– تشخيص ژنتيكي پيش از تولد

– و …

 

✅وب سايت هاي مرجع براي طراحي پرايمر و پروب

پايگاه هاي اطلاعاتي پرايمر و پروب جهت انجام Real-Time PCR:

?PrimerBank (http://pga.mgh.harvard.edu/primerbank):
اين پايگاه يك پايگاه عمومي براي پرايمرهاي Real-Time PCR مي باشد. پايگاه مذكور حاوي بيش از ٣٠٠٠٠٠ پرايمر بوده كه اكثر ژن هاي شناخته شده انسان و موش را در بر مي گيرند.

?RTPrimerDB (http://medgen.ugent.be/rtprimerdb)

?Real-Time PCR Primer Set (http://www.realtimeprimers.org)

? QPPD (http://web.ncifcrf.gov/rtp/gel/primerdb/default.asp)

 

♦️نرم افزارهاي طراحي پرايمر و پروب

?Primer3 (http://www.genome.wi.mit.edu/cgi-bin/primer/primer3_www.chi):
اين نرم افزار ابزاري عمومي و رايگان براي طراحي پرايمر و پروب مي باشد. كاربران اين نرم افزار قادر خواهند بود پارامترهاي متعدد مورد نظر خود را در آن اعمال نمايد.

?Primer Express (http://www.appliedbiosystems.com):
اين نرم افزار يك برنامه كامپيوتري تجاري متعلق به شركت Applied Biosystems بوده كه به طور گسترده براي پروب ها و پرايمرهاي TaqMan مورد استفاده قرار مي گيرد.

?Primer Biosoft International (http://www.premierbiosoft.com):
اين وب سايت تجاري نيز براي طراحي پروب و پرايمرهاي Real-Time PCR قابل استفاده مي باشد.

 

همانطور که ملاحضه می فرمایید، تکنیک ریل تایم، تکنیکی بسیار کاربردی و در عین حال نسبتاً پیچیده است. از همین روی مسلط بودن بر این تکنیک می تواند فرصت های شغلی شما را ارتقاء دهد و همچنین در پروژه های تحقیقاتی به شما در بهبود کار علمی کمک کند.

 

از همین روی و در راستای تقویت دانش، مهارت و تخصص شما مخاطبین گرامی، مجموعه ایمونولوژی تودی اقدام به برگزاری کارگاه های عملی ریل تایم نموده است. برای دریافت اطلاعات بیشتر پیرامون کارگاه Real Time PCR، کلیک کنید.